造血幹細胞移植を受ける小児の全血中におけるサイトメガロウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ヒトヘルペスウイルス6型、および単純ヘルペスウイルス1型/2型の同時検出のための、高感度かつ迅速なデュアル・ワンチューブ・リコンビナーゼ補助PCR法。

小児造血幹細胞移植（HSCT）における臨床転帰を改善するためには、サイトメガロウイルス（CMV）、エプスタイン・バーウイルス（EBV）、ヒトヘルペスウイルス6型（HHV-6）、および単純ヘルペスウイルス1型・2型（HSV-1/2）を早期に、迅速かつ高感度で検出することが極めて重要である。 これらのウイルスを同時に検出するために、デュアル・ワンチューブ・リコンビナーゼ補助PCR（DO-RAP）アッセイが開発された。本アッセイの分析感度および特異度は、70例の臨床全血検体を用いて評価され、その後検証された。 DO-RAPアッセイの検出限界（LOD）は、CMVおよびHHV-6で2コピー/反応、EBVで7コピー/反応、HSV-1/2で3コピー/反応であった。総検出時間は62分であった。全血検体において、DO-RAPはqPCRと比較して100%の感度を示し、qPCR陰性検体の中から37例の追加陽性例を同定した。 DO-RAPは、HSCT前、HSCT後0～30日、およびHSCT後31～60日のウイルス状態のモニタリングにおいてqPCRよりも高い感度を示し、レシピエントにおけるCMV、EBV、HHV-6、およびHSV-1/2の早期検出を可能にした。 ドナースクリーニングにおいても、DO-RAPはqPCRと比較して、CMV陽性およびEBV陽性の症例をそれぞれ1例ずつ追加で同定した。DO-RAPアッセイは、HSCT環境における全血検体中の低レベルのウイルス感染を迅速かつ正確に検出することができ、HSCT関連ウイルス感染症の日常的なモニタリングに有用なツールを提供する。