ムコ多糖症IVAにおけるGALNSの新規スプライシングバリアントとプライマー配列の再評価の必要性。

ムコ多糖症IVA型（MPS IVA；モルキオ症候群A型）は、リソソーム加水分解酵素N-アセチルガラクトサミン-6-スルファターゼ（GALNS）遺伝子の欠損によって引き起こされる常染色体劣性遺伝性疾患であり、進行性の全身性骨格異形成を引き起こす。これらの患者の予後を改善するためには、早期診断と酵素補充療法による早期介入が重要である。しかしながら、対立遺伝子の不均一性が高く、GALNS遺伝子のほとんどの変異体について強固な機能的証拠がないため、比較的多くの患者が遺伝学的に診断されていない。今回われわれは、韓国人のMPS IVA男児において、RNA解析により同定された新規のイントロン変異と、プライマー結合部位における一般的な良性変異に起因する対立遺伝子脱落（ADO）事象について報告する。生後28ヵ月の男児が、脊椎骨と股関節を含む多発性骨格形成不全を伴う、胸骨圧迫、脊柱後弯症、関節可動性亢進症を呈した。尿中グリコサミノグリカン総量はケラタン硫酸画分が優勢で上昇し、白血球中のGALNS（EC 3.1.6.4）活性は有意に低下していた。サンガー塩基配列決定が行われたが、臨床的意義が不明なヘテロ接合性のイントロン変異が1つ、c.566+3A > T（p.(?)）のみ同定された。患者はMPS IVAの臨床的および生化学的特徴を示したので、分子診断を明確にするために、患者とその家族の全ゲノム配列決定（WGS）を行った。WGSの結果、GALNS遺伝子にc.1019G > A (p.(Gly340Asp))とc.566+3A > T (p.(?))の複合ヘテロ接合体遺伝子型が認められた。mRNAの塩基配列解析の結果、c.566+3A > Tはエクソン5をスキップし、早発停止コドンを引き起こすことが確認された。その後の調査により、c.1019G > Aという変異型は、プライマーアニーリング位置の一般的な良性変異型（rs3859024:G > C）によるADOのため、最初のシークエンシングでは検出されなかったことが判明した。我々は、GALNS遺伝子のスプライシング欠損を伴う新規のイントロン変異を提示し、臨床医がWGSなどの診断ステップに進む前に、サンガーシーケンスで診断されなかった症例のプライマー配列を再検討することを提案する。